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技術(shù)文獻(xiàn)

遠(yuǎn)慕分析：菌種保藏及活化使用注意事項
閱讀次數(shù)：393 發(fā)布時間：2022/9/6 11:17:16
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 菌種保藏的方法很多，但原理大同小異。先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體；其次，根據(jù)其生理、生化性，人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件，抑制微生物的代謝作用，使其生命活動降低到低的程度或處于休眠狀態(tài)，從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀，防止變異。不管采用哪種保藏方法，在菌種保存過程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。
 
短期：斜面保藏
 
斜面保藏是目普遍的短期保藏法，操作簡單，使用方便，但需定期接種。因此工作量較大，而且傳代次數(shù)多易發(fā)生變異，因此，僅適用于短期經(jīng)常使用的菌種。
1. 配制培養(yǎng)基，營養(yǎng)成分濃度稍低為宜，特別是糖類盡可能降低，產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)添加少量碳酸鈣；
2. 斜面裝液量，斜面以傾斜后不超過試管長度 1/2 為宜；
3. 斜面培養(yǎng)，溫度較適稍低，時間較適略長；
4. 生長完成后，密封置于 2~8℃的冰箱中保藏。每傳代一次，霉菌、放線菌及有芽孢的細(xì)菌可保存 1~3 個月，酵母菌 2 個月，細(xì)菌1個月。
 
活化使用：
將斜面從冰箱中取出，細(xì)菌挑取菌落增菌，或霉菌切塊傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)好即可使用。
 
長/期：冷凍保藏
 
冷凍保藏是目使用較為廣泛的長/期保藏法，適用于所各類微生物，較之于斜面保藏，減少了工作量，延長了保藏時間。
1. 準(zhǔn)備斜面或平板新鮮培養(yǎng)物一個，10%的無菌甘油溶液；
2. 用甘油溶液將菌體或孢子洗脫下來，形成菌懸液；
3. 菌懸液分裝，凍存管裝液 1mL/支，后置于程序降溫盒；
4. 將程序降溫盒置于-80℃冰箱凍存；
5. 可保藏 1-2 年。
 
活化使用：
1. 將凍存菌株置于凍存盒中取出，準(zhǔn)備水浴溶解，切勿常溫融化；
2. 將菌株迅速置于水浴速溶，細(xì)菌 40℃，真菌 30℃，約 2min 全部溶解后接種到適宜培養(yǎng)基；
3. 采用適宜條件培養(yǎng)完成即可。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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