你知道培養(yǎng)基的凝固物質(zhì)有哪些嗎？跟著遠(yuǎn)慕生物來(lái)學(xué)習(xí)一下吧！
常用的凝固物質(zhì)為瓊脂，特殊情況下也可用明膠、卵白
蛋白、血清等。
抑制劑和指示劑：用于選擇、鑒定及判斷結(jié)果。
1.抑制劑：必須具有選擇抑制作用。目的在于抑制非檢出菌（非目的菌）的生長(zhǎng)，以利于檢出菌（目的菌）的生長(zhǎng)。常用膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒/酸鈉及一些染料和某些抗生素等。
2.指示劑：在培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑，是為了觀察細(xì)菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍(lán)、中國(guó)藍(lán)等酸堿指示劑。亞甲藍(lán)常用作氧化還原指示劑。
培養(yǎng)基不能凝固的原因①培養(yǎng)基制備過(guò)程中過(guò)度加熱
②低pH值造成培養(yǎng)基酸解
③瓊脂使用量不正確
④瓊脂未完/全溶解
⑤培養(yǎng)基成分未充分混勻
培養(yǎng)基的使用1.瓊脂培養(yǎng)基的融化
將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過(guò)高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時(shí)間,避免過(guò)度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開(kāi),室溫靜置片刻(約2min），以免玻璃容器發(fā)生破裂。
融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫，冷卻到47℃~50℃所需的時(shí)間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用，放置時(shí)間一般不超過(guò)4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基，應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，縮短融化后放置的時(shí)間。
將瓊脂培養(yǎng)基倒入類似檢測(cè)培養(yǎng)使用的獨(dú)立容器中,插入溫度計(jì),記錄并保存瓊脂的融化溫度。
加入樣品的培養(yǎng)基應(yīng)將溫度調(diào)節(jié)到44℃~47℃，或按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)溫度。
2.培養(yǎng)基的脫氣
必要時(shí)，在使用將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子；加熱后蓋緊蓋子，并迅速冷卻至使用溫度。
3.添加成分的加入
對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。將添加成分慢加入培養(yǎng)基并充分混勻，盡快分裝到待用的容器中。
4.培養(yǎng)基的棄置
所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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