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 一、用途

本產(chǎn)品主要適用于組織切片及脫落細胞染色。

二、原理

      核酸等電點為PH1.5-2.0,當PH＞2.0時，能結(jié)合帶正電荷的蘇木素。染料中的伊紅、亮綠、橙黃等為酸性染料，俾士麥棕為鹽基性染料，能與細胞漿中相反電荷的蛋白質(zhì)結(jié)合，從而染出鮮艷的結(jié)構(gòu)。

三、試劑盒組成

①、 蘇木素染色液：1×250ml；　　  ②、5%鹽酸液：1×25ml；  

    ③、飽和碳酸鋰：1×5ml；　　　　�、�、橙黃G-6染色液：1×250ml；

    ⑤、亮綠染色液：1×100ml；　　　　⑥、俾士麥棕染色液：1× 22ml；

⑦、伊紅染色液：1×100ml；　　　  ⑧、5%磷鎢酸：1× 10ml。

用戶須自備95%酒精、無水酒精、二甲苯、樹膠。

EA-36染色液配制：臨用前將亮綠染色液100ml、俾士麥棕染色液22ml、伊紅染色液100ml混勻，邊攪拌邊加入5%磷鎢酸10ml，充分混勻后即為EA-36染色液。注意：此液配成后*佳使用期為1－2個月，每次使用亦應(yīng)攪拌均勻。

0.5%稀鹽酸液配制：取5%鹽酸液25ml加水至250ml, 混勻即可。

稀碳酸鋰液配制：在250 ml蒸餾水中加入飽和碳酸鋰6滴，混勻即可。

梯度酒精液配制：80%酒精液：95%酒精84 ml、蒸餾水16 ml混勻；

70%酒精液：95%酒精74 ml、蒸餾水26 ml混勻；

50%酒精液：95%酒精53 ml、蒸餾水47 ml混勻。

四、染色方法

1、將未干的涂片置95%酒精中，固定15－30分鐘。

2、加水：將已固定的涂片依次置80%、70%、50%酒精、蒸餾水中各1分鐘。

3、染核：置蘇木素染色液中2－10分鐘（視溫度酌情調(diào)整），蒸餾水沖凈。

4、分色：置0.5%稀鹽酸液中數(shù)秒，以涂片轉(zhuǎn)成淡紅色為度，立即以蒸餾水沖凈。

5、藍化：置稀碳酸鋰液中約1分鐘，以涂片轉(zhuǎn)成藍色為度，以蒸餾水沖凈。

6、脫水：依次置50%、70%、80%酒精液中半分鐘，再置95%酒精液中2分鐘。

7、染漿：置橙黃G-6染色液中2分鐘，再置95%酒精液中迅速洗滌2－3次，以去掉多余的橙黃G-6。

8、再染漿：置EA-36染色液中2－5分鐘，再置兩缸95%酒精液中分別洗滌1－2次。

9、去水：置兩缸無水酒精中分別洗滌1－2次。

10、透明：置兩缸二甲苯中分別洗滌1－2次。

11、封片：用樹膠封固涂片。若不需保存標本，此步可略。

五、結(jié)果

上皮細胞：核染藍紫色，核仁紅色，胞漿依分化高低，分別染成橙黃、粉紅、綠色、淡藍色。

六、貯存、有效期　　　

本試劑盒應(yīng)置2－25℃、相對濕度40－75%處避光保存,有效期一年。　

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司