菌種使用的三個(gè)流程介紹_技術(shù)文章_上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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菌種使用的三個(gè)流程介紹
閱讀次數(shù)：186 發(fā)布時(shí)間：2023/2/8 10:28:35

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1、菌種要求
菌種試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0代)，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保/證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大腸埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC(B)44 102〕
白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F)98 001〕
生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B)64 941〕
乙型副傷寒沙門菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC(B)50 094〕

2、菌液制備
2.1金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物置于TSA上或TSB中，30-35℃，培養(yǎng)18-24h。
2.2生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物置于FTM中，30-35℃，培養(yǎng)18-24h。
2.3白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上，20-25℃，培養(yǎng)2-3天。
2.4黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上，20-25℃，培養(yǎng)5-7天，或直到活的豐富的孢子，用0.05%聚山梨酯的PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無(wú)菌氯化鈉將孢子洗脫，然后，吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用0.05%聚山梨酯的PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無(wú)菌氯化鈉制成適宜濃度的菌懸液。
2.5菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用；若保存在2～8℃，可在24小時(shí)內(nèi)使用。生孢梭菌孢子懸液可替代新鮮的菌懸液，孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使用。

3、陰性對(duì)照
為確認(rèn)試驗(yàn)條件是否符合要求，應(yīng)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。如陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司