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技術(shù)文獻(xiàn)

上海遠(yuǎn)慕講述:大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒特點(diǎn)
閱讀次數(shù):622 發(fā)布時(shí)間:2017/6/30 10:11:25
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     上海遠(yuǎn)慕講述:大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒的特點(diǎn),計(jì)算以及實(shí)驗(yàn)原理

     主要特點(diǎn)如下 :

 
    專(zhuān)一性強(qiáng):抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專(zhuān)一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的  對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大  差別。


    靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)  合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。


    計(jì)算:


    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。


    實(shí)驗(yàn)原理:

    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠絨毛膜促性腺激素?水平。用純化的小鼠絨毛膜促性腺激素?抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膠原酶?,再與HRP標(biāo)記的膠原酶?抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膠原酶?呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠絨毛膜促性腺激素濃度。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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