人酸性磷酸酶（ACP）ELISA檢測試劑盒使用注意事項_技術文章

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人酸性磷酸酶（ACP）ELISA檢測試劑盒使用注意事項
閱讀次數：853 發(fā)布時間：2017/11/27 10:00:23

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人酸性磷酸酶（ACP）ELISA檢測試劑盒產品簡介：

中文名：人酸性磷酸酶（ACP）ELISA試劑盒

供應商：上海遠慕

規(guī)格：48t/96t

保存：2-8℃

有效期：6個月

適用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床

主要成分：酶標板，試劑，標準品等

應用領域：僅供科研使用，不得用于醫(yī)學診斷

特異性：檢測天然或者重組，與其它蛋白與交叉反應

ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。

預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。

人酸性磷酸酶（ACP）ELISA試劑盒技術原理：

（1）。抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

（2）。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

（3）。酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

（4）。受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。

（5）。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

（6）。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

人酸性磷酸酶（ACP）ELISA檢測試劑盒免費代測人酸性磷酸酶（ACP）ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人酸性磷酸酶（ACP）ELISA試劑盒液體類標本：

包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

1）血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

2）血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

3）尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4）細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5）組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

人酸性磷酸酶（ACP）ELISA試劑盒產品優(yōu)勢：

專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

靈敏度高：由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

人酸性磷酸酶（ACP）ELISA檢測試劑盒注意事項：

1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性。

2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。

3.反應時間的誤差，做大量標本時，孔和*后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。

4.臨界值附近標本波動為正�，F象，任何試劑均不可避免�？梢钥紤]將標本做奇數次復檢。

5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響極大，建議校對加樣器。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司