技術(shù)文獻(xiàn)
在細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候,有時(shí)會(huì)在400倍顯微鏡下看到小黑點(diǎn)在做布朗運(yùn)動(dòng),小黑點(diǎn)有時(shí)呈點(diǎn)狀,有時(shí)呈小的片狀,目前業(yè)內(nèi)稱之為黑膠蟲。黑膠蟲污染一般來源于血清當(dāng)中,在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,黑膠蟲會(huì)隨細(xì)胞的傳代而傳代,其數(shù)量會(huì)不斷增多,并且會(huì)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
在黑膠蟲污染的早期對(duì)細(xì)胞并沒有什么影響,但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量達(dá)到一定程度時(shí),細(xì)胞就會(huì)因營(yíng)養(yǎng)不足而死亡,嚴(yán)重影響科研活動(dòng)的開展和進(jìn)行。
有黑膠蟲了怎么辦?
小編搜集了以下幾種辦法:
換好一點(diǎn)的血清
如果是貼壁細(xì)胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,可以向其中少加一點(diǎn)滋養(yǎng)細(xì)胞。加滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)有黑膠蟲的剛復(fù)蘇的細(xì)胞很有效!還有就是實(shí)驗(yàn)環(huán)境要注意好,保持細(xì)胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度。
換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。
建議清理無菌室所有物品,重新滅菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用無菌室做,細(xì)胞重新復(fù)蘇。
在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,堅(jiān)持天天洗,傳代時(shí)加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,蟲子就會(huì)些許減少,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)也不會(huì)有大的影響。
有材料稱minocycline具有一定的作用,可以和換液結(jié)合起來使用。
7.加入黑膠蟲去除劑CleanIt,只需將試劑將入培養(yǎng)基,便可輕輕松松與黑膠蟲說再見。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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