遠(yuǎn)慕生物：SDS-PAGE的主要應(yīng)用有哪些？_技術(shù)文章

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遠(yuǎn)慕生物：SDS-PAGE的主要應(yīng)用有哪些？
閱讀次數(shù)：1291 發(fā)布時(shí)間：2018/12/24 10:20:27

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SDS-Page 因易于操作，而具有廣泛的用途，是許多研究領(lǐng)域的重要的分析技術(shù)。

1. 蛋白質(zhì)純度分析；

2. 蛋白質(zhì)分析量的測定，根據(jù)遷移率大小測定蛋白質(zhì)亞基的分子量；

3. 蛋白質(zhì)濃度的測定；

4. 蛋白質(zhì)水解的分析；

5. 免疫沉淀蛋白的鑒定；

6. 免疫印跡的步；

7. 蛋白質(zhì)修飾的鑒定；

8. 分離和濃縮用于產(chǎn)生抗體的抗原；

9. 分離放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì)；

10. 顯示小分子多肽。

SDS-PAGE有效分離范圍取決于聚丙烯酰胺的濃度和交聯(lián)度，其孔徑隨著雙丙烯酰胺與丙烯酰胺比率的增加而減小，比率接近于1：20時(shí)，孔徑達(dá)到*小值。分子量低于10kD的小分子肽類，即使用較高濃度的聚丙烯酰胺凝膠的SDS-PAGE也不能完全分離，或是顯不出色，或是顯帶較弱，帶型彌散。且分子量越小，效果也越差。

為了能在SDS-PAGE上顯示測定小分子量的多肽，通常采取兩種方法：一是增加凝膠的濃度和交聯(lián)度，在制膠時(shí)加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝膠網(wǎng)限孔徑的溶質(zhì)分子，使用尿素、甘油或蔗糖等物質(zhì)；二是選擇緩沖液中的拖尾離子的種類和濃度以達(dá)到改善多肽的分離效果。

生物試劑的使用常識：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強(qiáng)腐蝕性、等特性）。
（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，絕對不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，才可取用另一種試劑。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后請及時(shí)將瓶放回原處，以免遺忘，帶來不便。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司