PCR污染被揭露，為XMRV的爭(zhēng)論火上澆油_技術(shù)文章

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PCR污染被揭露，為XMRV的爭(zhēng)論火上澆油
閱讀次數(shù)：601 發(fā)布時(shí)間：2019/10/30 10:32:28

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異養(yǎng)性小鼠白血病相關(guān)病毒 (XMRV) 與慢性疲勞綜合征 (CFS)、一種病因不明的衰弱狀態(tài)以及前列腺癌有關(guān)。這些關(guān)聯(lián)引發(fā)了激烈的爭(zhēng)論，隨后的研究要么支持要么質(zhì)疑這種關(guān)聯(lián)。

然而，大多數(shù)研究，無(wú)論是支持還是否定 XMRV 與這兩種疾病之間的聯(lián)xi，都嚴(yán)重依賴PCR檢測(cè)提供的證據(jù)。因此，當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒學(xué)在 2010 年 12 月發(fā)表了四篇研究文章，揭示了與 XMRV PCR 分析相關(guān)的潛在污染問題時(shí)，極大地影響了先前研究的有效性。所有四項(xiàng)研究都表明，老鼠的遺傳物質(zhì)會(huì)污染實(shí)驗(yàn)，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。

Robinson 等通過對(duì) 437 份人體組織樣本的 PCR 檢測(cè)表明，雖然在前列腺癌患者中檢測(cè)到了 XMRV 基因序列，但也檢測(cè)到了其他小鼠基因序列。奧克斯和他的同事證實(shí)，來自 CFS 患者的 XMRV 陽(yáng)性血液樣本對(duì)小鼠線粒體 DNA 檢測(cè)呈陽(yáng)性。此外，兩項(xiàng)研究都表明，健康患者的樣本對(duì) XMRV 和小鼠線粒體 DNA 均呈陽(yáng)性。據(jù)認(rèn)為，這些研究中使用的血液和組織樣本在 PCR 分析之前已被小鼠 DNA 污染。

正如 Sato 等人報(bào)告的，在 PCR 過程中也可能發(fā)生污染，他們?cè)趯?shí)際的 PCR 試劑中，即從 Invitrogen 公司提供的 RT-PCR 試劑盒中檢測(cè)到 MLV-編碼核酸。這種污染會(huì)導(dǎo)致對(duì) XMRV 的錯(cuò)誤檢測(cè)。因此，在他們的結(jié)論中，作者敦促在研究中使用 PCR 試劑盒之前謹(jǐn)慎評(píng)估，以消除假陽(yáng)性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。

XMRV 的 PCR 檢測(cè)目標(biāo)是 24 -nt gag-leader 的缺失，但是 Hue 等人在他們的研究文章中指出，這種缺失并不是 XMRV 獨(dú)有的，針對(duì)這種缺失的引物擴(kuò)增了在實(shí)驗(yàn)室中使用的 12 種不同鼠株和 5 種腫瘤細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)的 MLV 序列。順化等人從包括系統(tǒng)發(fā)育分析在內(nèi)的多管齊下的調(diào)查中得出結(jié)論，XMRV 不是一種真正的人類病原體。

這些*近發(fā)表的文章對(duì)以前的研究結(jié)果提出了嚴(yán)重的質(zhì)疑，這些研究結(jié)果聲稱證明了 XMRV 和 CFS 或前列腺癌之間存在聯(lián)系，并規(guī)定在未來的調(diào)查中要考慮和考慮這些污染源，以使新發(fā)現(xiàn)可信。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司