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技術(shù)文獻(xiàn)

遠(yuǎn)慕實驗:流式細(xì)胞技術(shù)檢測法
閱讀次數(shù):500 發(fā)布時間:2020/4/28 11:37:56
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流式細(xì)胞法是一種生物學(xué)技術(shù),用于對懸浮于流體中的微小顆粒進(jìn)行計數(shù)和分選。這種技術(shù)可以用來對流過光學(xué)或電子檢測器的一個個細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)的多種參數(shù)分析。流式細(xì)胞法是對懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子通過檢測標(biāo)記的熒光信號,實現(xiàn)高速、逐一的細(xì)胞定量分析和分選的技術(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質(zhì)的細(xì)胞分開,以獲得供生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究用的純細(xì)胞群體。

流式細(xì)胞技術(shù)檢測法原理:

包繞著鞘液的單細(xì)胞或微粒經(jīng)過流式細(xì)胞儀檢測區(qū)域時被激發(fā)光激發(fā)出熒光信號,形成的不同波長熒光信號被光電倍增管接收后轉(zhuǎn)換為電信號并進(jìn)一步轉(zhuǎn)換成計算機可識別的數(shù)字信號。其應(yīng)用范圍廣泛,常用于細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)等領(lǐng)域。


應(yīng)用:

1)了解細(xì)胞大小及顆粒度

2)細(xì)胞狀態(tài):pH 值、氧化還原、氧自由基、Ca2+

3)細(xì)胞表面蛋白:CD 系列等

4)細(xì)胞內(nèi)蛋白:胞內(nèi)因子、P53等

5)細(xì)胞功能檢測:細(xì)胞周期、凋亡 、分化、細(xì)胞增殖活力、吞噬功能、藥物泵的功能

7)免疫表型分析

流程:

    1)根據(jù)實驗需要預(yù)處理待檢測細(xì)胞

2)上機檢測相關(guān)參數(shù)

3)對所得結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析

4)細(xì)胞分選流程(略)

基礎(chǔ)背景:

l        提供背景資料,包括蛋白的表達(dá)位置,如是否膜蛋白或胞漿蛋白等

l        需要檢測的細(xì)胞,每種樣本提供的細(xì)胞數(shù)量要大于5×105

l        連接有或可連接熒光染料的一抗,并表明來源和應(yīng)用濃度

我們提供:詳細(xì)的實驗結(jié)果原始圖及數(shù)據(jù)分析報告;所分選的細(xì)胞

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