在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室里,污染是
細(xì)胞培養(yǎng)的大害,預(yù)防和避免細(xì)胞污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞污染的來源有哪些?
細(xì)胞污染的來源
細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞污染的來源主要有以下幾條途徑:
1、不潔的動(dòng)物組織標(biāo)本
很多動(dòng)物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外),但由于取材時(shí)不小心也會(huì)有污染的機(jī)會(huì)。組織本身含有細(xì)菌,如取材時(shí)不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡,也會(huì)帶菌,造成細(xì)胞污染。
2、空氣
空氣中含有大量的微生物,如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下,很容易造成細(xì)胞污染。另外,凈化工作臺(tái)使用過久,濾板未定期更換或長(zhǎng)久不更換,濾氣受塵埃堵塞,工作時(shí)不帶口罩或外界氣流過強(qiáng),污染空氣進(jìn)入操作區(qū),也會(huì)導(dǎo)致污染。春夏季南方地區(qū)多雨,空氣濕度大,含菌量多,工作不注意也易造成污染。
3、清洗消毒
培養(yǎng)用物品、材料洗刷不凈,培養(yǎng)用液和器材滅菌不徹底也會(huì)引入微生物和有毒物質(zhì)。
4、操作不當(dāng)
來自操作者的污染主要有以下幾方面:
1)器材和
溶液使用前未仔細(xì)檢查是否污染過,或者是否已經(jīng)消毒滅菌處理過,或者雖經(jīng)處理,時(shí)隔已久又末重新處理。
2)操作者未戴口罩、帽子,呼出氣中排出細(xì)菌和支原體。
3)培養(yǎng)瓶口未用75%酒精擦和燒灼。
4)操作者不當(dāng)心,動(dòng)作不正確而將吸管或無菌器具碰到了污染的物品,如手上皮膚和瓶子外壁等。
5)細(xì)胞傾液時(shí)倒出培養(yǎng)瓶或者滴落在超凈臺(tái)上,未及時(shí)擦凈或者灼燒。
6)灼燒的火不夠旺。
7)移液管吸取液體時(shí)將空氣中的氣流吸入培養(yǎng)瓶中。
8)長(zhǎng)時(shí)間的將離心管放在
離心機(jī)中,可能由于口沒有完全封閉而造成污染。
9)同一根吸管或者放置吸管的離心管長(zhǎng)時(shí)間使用會(huì)造成一管污染多瓶細(xì)胞交叉污染。
10)操作者來回走動(dòng)揚(yáng)起灰塵等。
5、血清
市面上出售的血清滅菌不徹底,潛在病毒和支原體污染
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司