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大多數(shù)原代貼壁細胞貼壁時間是6h到12h，細胞不貼壁有好多種原因的：
1、如果你用玻璃培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的話，有可能你的瓶子沒處理好；建議你用一次性培養(yǎng)瓶，進口的都可以。
2、一般做原代細胞貼壁培養(yǎng)用胰酶消化，消化的程度要掌握好，如果消化時間不到、分散不均勻不貼壁。一般消化有熱消化，就是放在37度里消化，時間比較短不好控制，傳代培養(yǎng)常用。還有就是冷消化放在4度里，一般在幾個小時以上，胰酶濃度也有要求的，一般都用0.125－0.25％之間。ph在7.6左右。
3、還有就是天然培養(yǎng)基的選擇，就是血清種類，血清能夠使細胞貼壁，并且提供細胞生長的重要營養(yǎng)成分。

細胞培養(yǎng)中的不貼壁及分化的解決辦法

如果細胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象，且細胞根本就不能錨定的解決辦法:
1、可以在鋪有瓊脂和瓊脂糖的培養(yǎng)皿上克隆細胞，也可在襯有瓊脂的甲基纖維素的非組織培養(yǎng)用平皿制備細胞克隆。
2、在這些支持物中應適當添加生長因子及添加物。3、如使用組織培養(yǎng)用平皿克隆細胞，應在灌制瓊脂等支持物鋪加飼養(yǎng)層。

如果細胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象，但細胞能夠錨定但貼壁不佳的解決辦法:
使用鋪加了甲基纖維素的組織培養(yǎng)用用培養(yǎng)皿進行細胞克隆。

細胞培養(yǎng)如果細胞不發(fā)生分化，解決辦法如下： 
1、更換能夠誘導細胞分化的培養(yǎng)條件。 
2、在細胞分離和傳代中使用選擇性培養(yǎng)基。

細胞培養(yǎng)中如果所養(yǎng)細胞喪失產(chǎn)物形成能力，解決辦法如下： 
1、采用PCR及Northern雜交方法，檢測相關(guān)基因表達能力。 
2、采用PCR及Northern雜交方法檢測報告基因和方案。 
3、使用分化誘導條件。 
4、在細胞分離和傳代過程中針對特定細胞使用相應的選擇培養(yǎng)基。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司