目細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)主要分為三大類：化學(xué)法、物理法及生物學(xué)法。但是沒有種方法是通用并且準(zhǔn)確無誤的，所以只有依據(jù)自己的實驗要求或者實驗探索選擇理想的方法，才能獲得漂亮的實驗結(jié)果。當(dāng)然也可以在輩們發(fā)的文獻(xiàn)中多看看，車之鑒可以減少很多不必要的花費。
細(xì)胞轉(zhuǎn)染低都是PCR試劑的問題嗎？PCR純度不夠確實會有這樣的問題，所以選擇PCR試劑很重要 主要還是以下幾點影響：
1. 其他微生物污染
您覺得您養(yǎng)的細(xì)胞 ，不，不，不 ，可能您只知道您養(yǎng)的是細(xì)胞，你不知道的是您的細(xì)胞可能背著您養(yǎng)了群小三，比如支原體，病毒，黑膠蟲等等，特別是支原體它可以更改細(xì)胞的特性，穿透細(xì)胞膜進(jìn)行基因改造，培養(yǎng)幾代可能看不到“它”給細(xì)胞做的整容效果，但是隨著代次的增多，細(xì)胞就慢慢體現(xiàn)出來了，“它”已經(jīng)變得不是從的那個“它”了，所以建議在轉(zhuǎn)染之進(jìn)行次支原體檢測，如有支原體清除干凈再轉(zhuǎn)染。
2.交叉污染：
如果同時養(yǎng)了很多細(xì)胞，在操作的時候沒有規(guī)范化，然后不小心讓A細(xì)胞到B細(xì)胞家里走了個親戚，蕞后的結(jié)果可能就是A細(xì)胞和B細(xì)胞不離不棄，若B細(xì)胞比較強悍，可能會發(fā)生鳩占鵲巢的事情。所以操作的時候定要注意，發(fā)生不明確的交叉污染，寧可錯殺千，不要放過個。
3.轉(zhuǎn)染高不高，時機(jī)很重要
轉(zhuǎn)染細(xì)胞真的沒有那么容易 ，想什么時候都可以，就像不尿急，占個廁所也拉不出來，相比非分裂的細(xì)胞—正在分裂的細(xì)胞往往會比靜止細(xì)胞更容易攝取并表達(dá)外源DNA，因此對大多數(shù)操作而言，細(xì)胞般建議在轉(zhuǎn)染當(dāng)天或者天種板，需要注意的是，鋪板細(xì)胞不宜過多，特別是長的癌細(xì)胞，因為如果細(xì)胞較多，甚至互相疊加，細(xì)胞自己都吃不飽，住不好，它也糟心的很，哪有時間和您玩轉(zhuǎn)染？
4. 抗生素和血清帶偏的轉(zhuǎn)染效果
本來想 ，能讓個細(xì)胞好好生長不容易 ，為了防治心里覺得細(xì)胞可能產(chǎn)生的各種污染 ，于是給他們加上各種抗生素預(yù)防，比如青霉素和鏈霉素，在細(xì)胞轉(zhuǎn)染的時候，若含有這兩個組分，可增加細(xì)胞的通透性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染過低或者細(xì)胞全死亡，所以細(xì)胞它是不會說話 ，要是會說話，肯定要罵我們了 ，好好的直給他們吃各種的藥。有些轉(zhuǎn)染技術(shù)如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染在有血清存在的情況下效率會很低，因此轉(zhuǎn)染要去除血清。Cell systems原代細(xì)胞采用無
抗體洗滌離心分選，可以讓細(xì)胞實驗更為精-確，使用他們的細(xì)胞發(fā)表的文獻(xiàn)影響因子在10分以上。
5. 另外DNA不純，攜親戚上陣或內(nèi)毒素超標(biāo)，都會引起轉(zhuǎn)染效果偏低或者細(xì)胞死亡現(xiàn)象的發(fā)生，選擇試劑很重要
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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