真菌檢驗基本上可分為培養(yǎng)技術和非培養(yǎng)技術兩大類。非培養(yǎng)技術又分為顯微鏡檢查技術、生化免疫檢查技術和分子生物學技術。者是直接觀察真菌形態(tài)，其中組織病理學檢查為侵襲性真菌感染診斷的金-標準；后者是檢測真菌的抗原、
抗體和核酸。這些技術的綜合使用可大大地提高侵襲性真菌感染診斷的準確性。
常見真菌檢驗技術
其中直接檢查、分離培養(yǎng)和病理組織檢驗為傳統(tǒng)的檢驗方法。而血清學真菌抗原抗體檢查以及真菌核酸檢測均為近些年發(fā)展起來的新技術、新方法，這些新方法不需要對標本中真菌進行培養(yǎng)，從而檢測周期短、檢測方法簡便，越來越受到臨床的歡迎。
1、真菌顯微鏡檢查
顯微鏡檢查是重要、基本的檢查方法。發(fā)現(xiàn)真菌的有形成分如菌絲、假菌絲或較多孢子往往提示真菌感染，臨床上具有診斷價值。但是，見到菌絲孢子并不能確定真菌的種類。直接鏡檢對于淺表和皮下真菌感染有幫助。陽性結果可確定真菌感染，而陰性結果不能排除診斷，主要原因與取材是否合格，標本處理是否得當有關，1次取材直接涂片法的漏診率高達45%。如果在無菌體液中發(fā)現(xiàn)真菌成分�？纱_定診斷，但在有菌部位則只有發(fā)現(xiàn)大量菌絲才有診斷意義。通過直接鏡檢一般可區(qū)分念珠菌、隱球菌和毛霉菌等，但進一步明確菌種需要通過培養(yǎng)鑒定來完成。
2、分離培養(yǎng)與鑒定技術
目引起深部真菌病的主要為念珠菌、曲霉菌和新型隱球菌，如分離出新型隱球菌、紅色毛廯菌等致病菌時診斷可以確定，而分離出條件致病菌如白念珠菌或煙曲霉，應結合臨床進行判斷，而對于孢子絲菌取膿液、組織塊作真菌培養(yǎng)，鑒定菌種即可確診。
無菌標本如血液、腦脊液和腹水分離出的條件致病菌常提示明確的感染，但來自痰、咽拭子、膿液以及尿標本分離出的條件致病菌則應慎重解釋結果。任何一株培養(yǎng)結果都不能輕易視為污染。
標本直接鏡檢的結果往往可以解釋培養(yǎng)的菌種，應強調直接鏡檢與培養(yǎng)檢查相結合的重要性。
3、組織病理學
組織病理學檢查是侵襲性真菌病診斷的金-標準。通過組織病理學檢查可確定真菌的種、屬，如隱球菌、念珠菌、曲霉、著色真菌等。如用特殊染色可提高陽性率。但確切的菌種還需要真菌培養(yǎng)確定，二者相互補充。
真菌在組織內一般表現(xiàn)為:
孢子：酵母和雙相型真菌在組織內表現(xiàn)為孢子；
菌絲：許多真菌在組織中只表現(xiàn)為菌絲。組織中發(fā)現(xiàn)無色分隔、分支的菌絲多為念珠菌和曲霉。粗大、不分隔、少分支的菌絲為接合菌，多為毛霉、根霉、犁頭霉等。粗大、少分支、有隔的菌絲為蛙類真菌。棕色菌絲為暗色絲孢霉病，由暗色孢科真菌引起；
菌絲和孢子主要見于念珠菌感染；
顆粒為組織內有菌絲形成的團塊；
球囊獲內孢囊球囊內含有內孢子，為球孢子菌或鼻孢子菌在組織內的特征性結構。
4、真菌非培養(yǎng)檢驗技術
真菌非培養(yǎng)檢驗技術既是一門傳統(tǒng)的技術，也是一門新興的技術。就傳統(tǒng)而言，顯微鏡直接檢查和組織切片檢查都屬于此類，而有關真菌結構或抗原檢查、抗體檢查和核酸檢查則屬于后一類。例如，現(xiàn)在應用廣泛，并已經作為侵襲性真菌感染診斷標準的G試驗、GM試驗以及隱球菌抗原檢查均屬于新興的真菌檢驗的非培養(yǎng)技術。其中G試驗和GM試驗-具有代表性
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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