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技術(shù)文獻(xiàn)

蛋白質(zhì)沉淀方法之有機(jī)溶劑沉淀法
閱讀次數(shù):101 發(fā)布時間:2024/11/28 10:13:05
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有機(jī)溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產(chǎn)品的分離純化

有機(jī)溶劑的沉淀機(jī)理是降低水的介電常數(shù),導(dǎo)致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,/后析出。

該法優(yōu)點在于:

1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質(zhì)或其它溶劑只在一個比較窄的有機(jī)溶劑濃度下沉淀;

2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易;

3)在生化制備中應(yīng)用比鹽析法廣泛。

但是,在常溫下,有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。因此,操作要求在低溫下進(jìn)行。有機(jī)溶劑的選擇先是能和水混溶,使用較多的有機(jī)溶劑是乙醇、甲醇、丙酮,還有二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。

有機(jī)溶劑沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸產(chǎn)品的分離純化

有機(jī)溶劑的沉淀機(jī)理是降低水的介電常數(shù),導(dǎo)致具有表面水層的生物大分子脫水,相互聚集,/后析出。

該法優(yōu)點在于:

1)分辨能力比鹽析法高,即蛋白質(zhì)或其它溶劑只在一個比較窄的有機(jī)溶劑濃度下沉淀;

2)沉淀不用脫鹽,過濾較為容易;

3)在生化制備中應(yīng)用比鹽析法廣泛。

但是,在常溫下,有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。因此,操作要求在低溫下進(jìn)行。有機(jī)溶劑的選擇先是能和水混溶,使用較多的有機(jī)溶劑是乙醇、甲醇、丙酮,還有二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。

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