技術(shù)文獻
載體蛋白KLH,BSA,OVA偶聯(lián)-多肽修飾肽-載體蛋白偶聯(lián)多用于制備抗多肽類抗體,單獨的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應,而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細胞,進一步誘導B細胞免疫反應。
請記住,免疫系統(tǒng)是將肽-蛋白作為一個整體來激起免疫反應的,因而產(chǎn)生的抗體中有針對多肽的,有針對鏈接劑的,也有針對載體蛋白的。其中常見的載體蛋白有如下幾種:
KLH(KeyholeLimpetHemocyanin),即血藍蛋白,是在某些軟體動物、節(jié)肢動物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發(fā)現(xiàn)的一種游離的藍色呼吸色素。血藍蛋白含兩個直接連接多肽鏈的銅離子,與含鐵的血紅蛋白類似,它易于氧結(jié)合,也易與氧解離,是已知的惟一可與氧可逆結(jié)合的銅蛋白,氧化時呈青綠色,還原時呈白色。其分子量450000~130000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性,因而是常被選用的載體蛋白。
BSA(BovineSerumAlbumin),即牛血清白蛋白,屬于穩(wěn)定的和可溶的白蛋白。其分子量為67x103Da(含有59個Lys)。大約有30-35個主要氨基可用于與鏈接劑發(fā)生共軛反應,使得BSA成為一種很流行的弱抗原化合物載體蛋白。
BSA的不利之處在于在很多實驗中,它被當作封閉劑使用,如果多肽-BSA偶聯(lián)物的抗血清用于這樣的檢測分析中,通常會出現(xiàn)假陽性,因為這些血清含有抗BSA的抗體。
OVA(Ovalbumin),即雞卵白蛋白,分子量為45x103Da。它可作為第二載體蛋白去驗證抗體是否特異性地只針對多肽而并非載體蛋白(如BSA)。
巰基修飾(通過Cys的側(cè)鏈)用于與KLH、BSA或OVA發(fā)生共軛反應,所有攜帶巰基反應的功能基團經(jīng)修飾都可被用來發(fā)生共軛反應。其中常見的有以下幾種:
碘乙酰胺(Iodoacetamide)
馬來酰亞胺(Maleimide)
烷基鹵(Alkylhalide)
KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶聯(lián)
小肽/半抗原必須耦合到載體蛋白(KLH,BSA,Ova),才可以獲得高效的抗體。一般來說,多肽可以與蛋白偶聯(lián)的條件如下:
有一個自由的氨基或羧基。
2.半胱氨酸上的-SH也可以與載體蛋白偶聯(lián)目我公司提供高質(zhì)量的偶聯(lián)載體蛋白(KLH,BSA,OVA)。
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司
請輸入要搜索的關(guān)鍵詞
上海遠慕生物科技有限公司:細胞凍存液,氨芐青霉素溶液,人白介素ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,顯色試劑盒,新生牛血清,標準胎牛血清,牛血清白蛋白溶液,小鼠血漿,雞紅細胞,透明質(zhì)酸酶溶液,微生物培養(yǎng)基,胰蛋白酶儲存液,兩性霉素B溶液,LB冷凍緩沖液,ABTS試劑,磷酸酶抑制劑,EB緩沖液,熒光染色試劑盒,肥大細胞染色液,人源基因質(zhì)粒,胡蔓藤堿乙標準品,番茄紅素標準品,Pd-C-II標準品,知母皂苷E標準品,穿刺培養(yǎng)基,puc19質(zhì)粒,CPD抗凝劑,熒光抗體稀釋液
地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 電話:021-58999639 傳真:021-58999639 技術(shù)支持:阿儀網(wǎng) 總訪問量:7449091