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　　染色緩沖液（BSA）的配制：

PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。

準備單細胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養(yǎng)的細胞。

用冰染色緩沖液洗細胞2次，離心細胞，用冰染色緩沖液重懸細胞，使終濃度為2×107細胞/ml。

各取50ul（106細胞）細胞懸液到2個圓底的Ep管中。

根據(jù)抗體說明書在其中1個Ep管中加入合適的抗體量，另外1個加入同型對照抗體，冰上避光孵育20分鐘（建議每5分鐘輕輕混勻，以免細胞沉積）。根據(jù)熒光抗體的親和力適當(dāng)延長染色時間。

用1ml染色緩沖液洗2次去除未結(jié)合的抗體，300×g離心5分鐘，每次離心后小心吸取上清。

用適量染色緩沖液（如500ul）重懸細胞。

流式細胞儀分析染色結(jié)果（不超過4小時）。如果暫時無法檢測，也可以將染色后的細胞用4%多聚甲醛固定后，避光儲存在4度。固定后的細胞可以保存zui多一個星期。

抗體規(guī)律：

（1）初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)抗原次進入機體時，需經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生抗體，且抗體產(chǎn)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時間也較短。

（2）再次反應(yīng)產(chǎn)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進入機體后，開始時，由于原有抗體中的一部分與再次進入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低。隨后，抗體效價迅速大量增加，可比初次反應(yīng)產(chǎn)生的多幾倍到幾十倍，在體內(nèi)留存的時間亦較長。

（3）回憶反應(yīng)產(chǎn)生抗體：由抗原刺激機體產(chǎn)生的抗體，經(jīng)過一定時間后可逐漸消失。此時若再次接觸抗原，可使已消失的抗體快速上升。如再次刺激機體的抗原與初次相同，則稱為特異性回憶反應(yīng)；若與初次反應(yīng)不同，則稱為非特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)引起的抗體的上升是暫時性的，短時間內(nèi)即很快下降。