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昆蟲細胞培養(yǎng)的發(fā)展和關鍵點介紹
閱讀次數(shù):379 發(fā)布時間:2023/5/11 10:10:00
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隨著生命科學的迅速發(fā)展,細胞工程愈來愈受到人們的重視。以昆蟲細胞為對象的細胞培養(yǎng)技術在現(xiàn)代實驗生物學上具有重要的價值,已經(jīng)廣泛地應用于醫(yī)學、農(nóng)業(yè)及生物學的各個域。昆蟲細胞是農(nóng)業(yè)生物應用方面的技術,主要是提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養(yǎng)制造宿主的病毒,這些病毒可以引起昆蟲流行病,但對人畜和植物無害,因而可作病毒殺蟲劑。還可以生產(chǎn)某些藥用蛋白。

許多昆蟲培養(yǎng)基配方正不斷得到改進,以使之適于細胞生長。zui通用的商品培養(yǎng)基有Grace氏培養(yǎng)基、TC-100、IPL-41、TNM-FH以及經(jīng)改良的哺乳動物細胞培養(yǎng)基TC199-MK等。

細胞培養(yǎng)的關鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細胞系的生長。昆蟲細胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補加FBS,血清提供了細胞生長過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì)和微量元素,使細胞能健康生長和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點:價格高;每批血清的質(zhì)量不同,影響細胞的生長和病毒復制;血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復雜。因此,無論工業(yè)上或?qū)W術上,開發(fā)無血清培養(yǎng)基都是必然的趨勢。
由于在無血清培養(yǎng)基中含有從血清或動物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細胞在無血清低蛋白或無蛋白培養(yǎng)基環(huán)境中對剪切應力更為敏感,故需適當提高保護劑的濃度。無血清培養(yǎng)基的應用有時會降低重組蛋白的產(chǎn)量,在無血清培養(yǎng)基內(nèi),較高的細胞生長密度與相對較低水平的重組蛋白產(chǎn)量這一事實表明,促進細胞分裂的因子與促進重組蛋白生產(chǎn)的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。無血清培養(yǎng)基配方還需進一步改進以便適應于重組蛋白的表達。

中文名稱:HighFive昆蟲細胞(保成活)
規(guī)格:1支
供應商:上海遠慕生物
應用:用于桿狀病毒增殖和重組蛋白表達
誘導方法:桿狀病毒誘導

細胞特點:     
可用于 Express Five?SFM。High Fiv昆蟲細胞 (BTI-TN-5B1-4) 是從親代 Trichopulsia ni 細胞系分離得到的克隆,通常用于使用桿狀病毒表達載體系統(tǒng) (BEVS) 的重組蛋白表達。 這種細胞能在 Express Five? SFM 中進行無血清懸浮培養(yǎng),顯著節(jié)省了與無血清和/或懸浮培養(yǎng)時的培養(yǎng)物馴化相關的時間和經(jīng)費。 Express Five? SFM 是使High Five細胞實現(xiàn)佳生長和重組基因表達的優(yōu)化無蛋白昆蟲細胞培養(yǎng)基。

進行如下測試: 檢驗每個批次從超低溫冷凍法回收后的生長和活力,并測試其是否含有支原體。

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