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1.瓊脂培養(yǎng)基的融化

將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min），以免玻璃容器發(fā)生破裂。

融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫，冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用，放置時間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基，應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，縮短融化后放置的時間。

將瓊脂培養(yǎng)基倒入類似檢測培養(yǎng)使用的獨立容器中,插入溫度計,記錄并保存瓊脂的融化溫度。

加入樣品的培養(yǎng)基應(yīng)將溫度調(diào)節(jié)到44℃~47℃，或按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)溫度。

2.培養(yǎng)基的脫氣

必要時，在使用將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子；加熱后蓋緊蓋子，并迅速冷卻至使用溫度。

3.添加成分的加入

對熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。將添加成分慢加入培養(yǎng)基并充分混勻，盡快分裝到待用的容器中。

4.培養(yǎng)基的棄置

所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。