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培養(yǎng)液pH下降很快的可能原因分析
閱讀次數(shù):433 發(fā)布時間:2024/2/22 10:03:12
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  通常細胞生長得非?鞎r,pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。

(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。

(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。

(3)松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

(4)在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。

(5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

通常細胞生長得非?鞎r,pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。

(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。

(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。

(3)松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

(4)在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。

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