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　　PK-15豬腎細胞

Catalogue No :  C267

Product Format :  a T25 flask

Culture Properties： 貼壁

Complete Growth Medium :  89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere :   air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application :  Cells ａnd cancer research

NOTE :  FOR RESEARCH USE ONLY

PK-15豬腎細胞 Operation steps for cell culture：

1.吸走用于培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞；

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài)，導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞完全漂浮�；靹蚣毎麜r盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；

4.將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例 : 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation：

1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

PK-15豬腎細胞  遠慕生物Tips：

1.細胞經(jīng)過運輸后，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正�，F(xiàn)象。貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

2.細胞生長不均時，可以將細胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。

3.細胞生長緩慢時，可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)（高不超過20%），也可以根據(jù)細胞生長狀態(tài)，選擇傳代細胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4.不同細胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準，嚴禁消化到細胞完全漂浮�？蛻粝�化過度導致細胞死亡、漂浮、生長緩慢，不提供免費售后服務。

5.干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復蘇一支，若復蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方不提供免費售后服務。

6.細胞狀態(tài)正常時，應盡快凍存細胞保種，凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責，客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司

標簽：PK-15豬腎細胞   

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